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SNP检测 SNP/单核苷酸多态性分析       SNP(Single Nucleotide Polymorphism),即单核苷酸多态性,是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态。一般来说,一个SNP位点只有两种等位基因,因此又叫双等位基因。SNP在人类基因组中的发生频率比较高,大约平均每1000个碱基中就有一个多态位点。有些SNP位点还会影响基因的功能,导致生物性状改变甚至致病。单核苷酸多态性是研究人类家族和动植物品系遗传变异的重要依据,因此被广泛用于群体遗传学研究(如生物的起源、进化及迁移等方面)和疾病相关基因的研究,在药物基因组学、诊断学和生物医学研究中起重要作用。 服务项目1. TaqMan探针法       针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合于核酸外切酶活性的底物,从而将探针5’-端连接的荧光分子从探针上切割下来,破坏两荧光分子间的PRET,发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。2. SNaPshot法       该技术由美国应用生物公司(ABI)开发,是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术,也称小测序,主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中,引物延伸一个碱基即终止,经ABI测序仪检测后,根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点,根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类,从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。3. HRM法       高分辨率熔解曲线分析(HRM)是近几年兴起的SNP研究工具,它通过实时监测升温过程中双链DNA荧光染料与PCR扩增产物的结合情况,来判断是否存在SNP,而且不同SNP位点、是否是杂合子等都会影响熔解曲线的峰形,因此HRM分析能够有效区分不同SNP位点与不同基因型。这种检测方法不受突变碱基...
HE染色 实验介绍        苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中基本、使用较多的技术方法。       细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强。而细胞浆则相反,它含有碱性物质,和酸性染料(伊红)的亲和力较大。因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后,细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色,细胞浆、肌纤维、胶原纤维等呈不同程度的红色。如何处理组织样本?首先需要快速取材,然后尽快的放入适量的固定液中固定,固定液需根据不同组织类型选择合适的固定液。下面给大家列举几种常见组织的固定液选择方法: 1、眼球固定液选择:FAS眼球固定液注 意 事 项:将眼球组织轻柔摘取后放入FAS眼球固定液中固定24H,结合本公司制片时的特殊手法结果更有保障,固定液是组织的10-20倍。 2、肌肉   固定液选择:GD固定液注 意 事 项:将新鲜肌肉组织取下后放入GD固定液中固定24H以上,固定液是组织的10-20倍。 3、睾丸固定液选择:Bouin's固定液注 意 事 项:固定24H后转移至75%酒精保存运输,固定液是组织的10-20倍。 4、脂肪固定液选择:脂肪专用固定液注 意 事 项:将新鲜脂肪组织取下后放入脂肪专用固定液中固定24H以上,需要使用脱脂棉花将组织压在固定液中,固定液是组织的10-20倍。 5、骨、牙齿组织固定液选择:通用型组织固定液注 意 事 项:固定24H后再脱钙,固定液是组织的10-20倍。 6、其他动物组织固定液选择:通用型组织固定液注 意 事 项:组织需要固定24H,固定液是组织的10-20倍。 哪些因素会影响到HE染色结果呢?1、固定不充分,会直接影响组织HE染色出现泛白现象。2、组织经过强酸(比如酸脱钙的骨组织)处理,会出现核不着色的现象。 3、组织固定过久,固定液成分里面的甲醛会变成甲酸...
细胞培养服务 细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养,既包括微生物细胞的培养,细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。       细胞系因其具有无限传代增殖、体外培养、培养条件简单等原因,如今已被广泛的应用于各类疾病的研究中。        现在实验室之间的细胞系共享很普遍,污染了的细胞系被反复使用,和用错细胞系的实验研究经常发生,而这种情况很有可能在一些实验室持续数年或数十年。据统计国外实验室约20%细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复等严重后果,也浪费了研究者大量时间、精力和金钱。2011年美国国家标准学会专门颁布了一份细胞STR(ShortTandemRepeat,短串联重复序列)鉴定标准。STR鉴定目前已被ICLAC、ATCC等权威机构作为金标准应用于细胞鉴定,越来越多的杂志要求在投稿时提供细胞STR分型数据。        HTHealth近年来从国内各大细胞库广泛引入细胞系,目前已筛选出280多种状态良好的细胞系,构建起华北地区较大的一家细胞库。HTHealth本着严谨负责的态度,对细胞库中几乎所有的人源细胞系进行了STR分型鉴定,目前160多种人源细胞系STR鉴定结果为阳性,为您的科研工作提供安全保障。
免疫组化 实验原理       免疫组化,是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使结合抗体的显色剂进行显色来确定组织或细胞内抗原,对其进行定位、定性及相对定量的研究。是生命科学研究中常用且重要的实验方法。       显然,免疫组化(IHC)结果获取过程中关键的步骤是使用正确的抗体和抗原特异结合并对信号进行放大,但其实免疫组化(IHC)过程中所有的步骤对于生成出色的图像结果都十分重要。免疫组化(IHC)染色经常很难获得优的结果,但通常可以通过对一些实验流程的变量(例如样品制备、抗原修复以及孵育时间等)进行调整实现优化。实验步骤  技术优势1. 特异性强免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时,才会出现交叉反应。2. 敏感性高在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等敏感性不高的技术,那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP三步法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合,这样高敏感性的抗体抗原反应,使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。3. 定位准确、形态与功能相结合       该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。客户提供1 、待进行免疫组化的实验材料及材料信息,我们接受以下形式的实验材料组织标本根据抗原来选择适宜的固定液,时间以12-24h左右为佳细胞片固定后晾干,低温、密闭保存石蜡块取材完整、组织固定充分的合格蜡块石蜡切片涂有粘片剂的优质石蜡切 2 、实验所需要的抗体信息及标记方式我们提供:详细实验总结报告(包括实验方法、拍照结果、信号强度分析等);提供实验后的切片。
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